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梯度PCR儀的原理
[ 2013/6/29 12:31:29 ] [轉載請注明來源:就是要儀器網(wǎng)]

梯度PCR儀

梯度PCR儀
梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內(nèi)按照梯度設置,根據(jù)結果,一步就可以摸索出最適反應條件。一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。因為被擴增的不同的DNA片段其最適合的退火溫度不同,通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的最適合退火溫度進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣可節(jié)省試驗時間、提高實驗效率,又節(jié)約實驗成本。在不設置梯度的情況下亦可當做普通的PCR用。梯度PCR儀多應用于科研、教學機構。
目前,國內(nèi)用戶比較多的進口品牌主要有伯樂,艾本德,TECHNE等,09前還有一個MJ,不過現(xiàn)在已經(jīng)被伯樂收購了。國產(chǎn)梯度PCR儀較專業(yè)的生產(chǎn)企業(yè)有:西安天隆、北京六一等幾家專業(yè)的PCR生產(chǎn)企業(yè)。
國產(chǎn)梯度PCR儀
PCR儀適用于分子生物學、醫(yī)學、食品工業(yè)、司法科學、生物技術、環(huán)境科學、微生物學、臨床診斷、流行病學、遺傳學、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達等領域以聚合酶鏈式反應(Picymerase Chain Reaction , PCR)為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。 
梯度PCR儀TC-512型除具有上述標準PCR儀功能外,其梯度模塊還能同時進行多達12個不同退火溫度的PCR反應,在梯度模塊上,可實現(xiàn)對梯度溫度和梯度寬度等參數(shù)的調(diào)整,自由編程12道溫度,梯度實現(xiàn)不同樣品的退火溫度并同時進行熱循環(huán)。僅一次實驗就能確定特定體系相應的最優(yōu)退火溫度。從而可在短時間內(nèi)對PCR實驗進行優(yōu)化,大大提高PCR科研效率。 
實時熒光定量PCR儀原理:
實時熒光定量PCR技術是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析。
在常規(guī)PCR基礎上添加了熒光染料或熒光探針。熒光染料能特異性摻入DNA雙鏈,發(fā)出熒光信號,而不摻入雙鏈中的染料分子不發(fā)出熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物增加完全。 
FUNGLYN 實時熒光定量PCR儀技術創(chuàng)新:
* 采用新型半導體控溫技術,控溫精度達到0.01℃,保證了擴增反應的精確性;
* 采取光纖導入的方式,激發(fā)光源LED和鹵鎢燈可選,采用側底部激發(fā)的方式,減少了光的邊緣效應,最大限度避免了光信號的衰減,在解決了光強均一性問題的同時,延長了鹵素燈的使用壽命。
* 六區(qū)獨立溫度控制,可設置不同的反應條件,避免了熱傳導過程中的邊緣效應,提升了溫度控制精度、樣品溫度均一性等性能。 
* 先進的熒光檢測系統(tǒng),新型耐用的鹵鎢燈,-20℃冷態(tài)低溫CCD為熒光檢測裝置,實現(xiàn)真正意義上的“實時、同步”。 
* 12列溫度梯度功能,可同時運行12個不同的退火溫度,在一次實驗中即可摸索出最適宜的退火溫度,為用戶提供了最大的便利。 
* 多通道檢測,最多可升級到六通道;
* 高分辨率的熔解曲線軟件分析功能預留,可根據(jù)分析結果調(diào)整反應溫度,重新設定信號采集點,消除引物二聚體,非特異性擴增等的影響,使得絕大多數(shù)擴增反應用SYBR GREEN 1就能夠完成,省去了合成探針等的成本;
* 智能化的斷電保護功能,意外斷電時可自動存儲實驗結果,開機后可恢復開始實驗;
* 內(nèi)嵌式電腦設計,windows XP系統(tǒng)操作方便; 
* 試劑耗材等需求開放,兼容國內(nèi)外品牌;
* 體積小,噪音低,重量只有18KG,適合任何實驗室。 
溫度控制技術闡述---全球首創(chuàng)的六區(qū)控溫技術(專利號: 01274389.5):
1、溫度控制是PCR實驗中的主要因素,對實驗結果產(chǎn)生直接影響。
Funglyn Biotech所有產(chǎn)品均采用“6區(qū)獨立溫度控制”技術,避免了熱傳導過程中的邊緣效應,有效提升了控溫精度及孔間溫度均一性,從而保障實驗結果的可信度。
2、將96孔樣品板等分為16(4x4)x 6個模塊。每個模塊都有自己的溫度控制系統(tǒng),既可以單獨設置不同的溫度,又可同時進行單一的溫度條件實驗。
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