近年來，隨著多功能酶標(biāo)儀在國內(nèi)各高校實驗室逐漸推廣開來，多功能酶標(biāo)儀品牌和型號也逐漸多了起來，亂花漸欲迷人眼。除了三大傳統(tǒng)優(yōu)勢品牌PE、MD和 TECAN，還出現(xiàn)了眾多后來者插足此市場，如收購了芬蘭雷勃的Thermo、從發(fā)光起家的Berthold、針對藥篩領(lǐng)域的BMG以及新興的 BioTek等品牌。各品牌都有各自的一個甚至多個系列產(chǎn)品線，特性各不相同，選購時各種技術(shù)參數(shù)、技術(shù)指標(biāo)令人眼花繚亂。

    本文嘗試從用戶實際使用的角度，探討應(yīng)該如何看待花樣繁多的參數(shù)特性，希望能幫助大家找到真正合適自己的多功能酶標(biāo)儀。

一、濾片Vs光柵

    多功能酶標(biāo)儀的分類方法眾多，但最簡單的莫過于用他們的濾光方式來作分界線。一般來說，可以分為濾光片型和 光柵型兩大類。當(dāng)然也有一些型號，例如Synergy4和EnVision等，一臺機(jī)器里面同時裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時完成同一個 檢測，還是想用光柵的時候用光柵，該用濾片的時候用濾片;還有一些實驗非用其中一個不可，另一模塊實現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在 了一起，并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。

    總體來說，濾片技術(shù)由于發(fā)展已久，配合二向色鏡(其實也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng)，可以實現(xiàn) 大部分實驗的需要。目前常規(guī)多功能酶標(biāo)儀中最高的檢測靈敏度就是用濾光片型做出來的，例如TECAN Infinite F500的熒光檢測的靈敏度可以達(dá)到0.04 fmol/孔(熒光素，384孔/80ul)。但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長和數(shù)量限制，不可能滿足日益增加的實驗類型的檢測需要，而且有時需要對物質(zhì)的吸收、激發(fā)和發(fā)射光譜進(jìn)行研究，所以后來就誕生了光柵型的儀器。

    最先推出光柵的是MD公司，其光柵習(xí)慣上稱為單光柵。由于光純度的不足，在光柵的后面又加入了一組帶阻濾 片，再把雜光過濾一遍，達(dá)到了5×10-4的雜光率，基本與純粹的濾光片系統(tǒng)一致。后來TECAN又發(fā)展出了雙光柵技術(shù)，通過兩次光柵濾光，雜光率降到了 10-6。后來，Thermo、BioTek和PE的部分新款儀器等都使用了類似雙光柵技術(shù)。由于激發(fā)和發(fā)射各用了一組雙光柵，此類機(jī)器又被稱為四光柵型 多功能酶標(biāo)儀。

    光柵型酶標(biāo)儀的推陳出新，使得用戶在波長選擇上不再受限，而且在雜光率、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系 統(tǒng)。例如，TECAN公司在2008年底推出使用了第三代四光柵系統(tǒng)的M1000酶標(biāo)儀，雜光率降到了2×10-7的新低，還實現(xiàn)了帶寬2.5～20nm 連續(xù)可調(diào)。這些都是目前濾光片型酶標(biāo)儀所不能或者較難實現(xiàn)的。

二、雜光率&波長準(zhǔn)確性

    光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流，多家廠家共同努力，已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中，最關(guān)鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長選擇的準(zhǔn)確性了。

雜光率指得就是光源通過光柵后，得到的光線中，“不需要”的波長的光占所標(biāo)稱波長的光的比例，表征了濾光的 純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性，無論使用濾光片還是光柵，雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來說，濾光 片型的雜光率在10-4～10-5之間，光柵型的可以做到10-6～10-7。由于此類雜光是非特異的，而且會直接進(jìn)入最后的檢測器，所以有多少的雜光就 會引入多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測過程中，由于檢測器存在放大效應(yīng)，雜光率的干擾也會被指數(shù)級放大。因此，雜光率就是一個濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo)。

    光柵的另一個重要指標(biāo)就是波長選擇的準(zhǔn)確性。因為很多檢測是依賴于物質(zhì)在某個波長的特征圖譜。就像 DNA/RNA的OD260濃度測定，實際檢測波長偏離260nm幾個nm以上的話，OD值與最終濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會發(fā)生改變。因此，一組性能優(yōu)良的 光柵系統(tǒng)，他的波長選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5～1nm之間。波長偏離過大有時就會影響到最終結(jié)果的準(zhǔn)確性。

    這兩個可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)最關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù)，直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測量的結(jié)果，是實驗結(jié)果可靠性的最基本要求

三、品牌與售后

    不同品牌的儀器往往性能側(cè)重點(diǎn)有所不用。例如，PE公司由于在試劑領(lǐng)域有較深底蘊(yùn)，他們的酶標(biāo)儀在配合使用 他們的TRF系列檢測試劑盒上作了多項優(yōu)化，因此PE的酶標(biāo)儀普遍來說在TRF領(lǐng)域會有較多的特色功能和相對較高的性能指標(biāo)。而像TECAN，就把研發(fā)的 重點(diǎn)放在了四光柵的研究方面，近年來相繼推出了第二和第三代光柵型多功能酶標(biāo)儀(M200、M1000)，成為四光柵酶標(biāo)儀領(lǐng)域的領(lǐng)頭羊。而像多功能酶標(biāo) 儀上加入比色杯、微量檢測板等功能也是TECAN從用戶角度考慮作出的技術(shù)創(chuàng)新，后來此類技術(shù)都成為了Thermo、BioTek等品牌紛紛仿效的對象。

    最后，無論是一臺多好的酶標(biāo)儀，脫離了良好的售后服務(wù)體系也是難以正常運(yùn)作的。今年，各家廠商都在中國國內(nèi) 設(shè)立了辦事處甚至亞太區(qū)總部，有些產(chǎn)品還專門研發(fā)了中文版的軟件和說明書。這都說明了廠家對中國市場的重視。而正因為這種重視，無論是廠家直銷還是選擇代 理分銷，都會對國內(nèi)的售后服務(wù)提出各自的要求和期望，最基本的就是普及儀器的應(yīng)用工程師和維修工程師網(wǎng)絡(luò)體系。

   可以說，國內(nèi)的各大城市里面，基本已經(jīng)做到了部分品牌總有一個工程師在你身邊。選購之前多與工程師交流，充分了解各家的性能特長和售后情況，反復(fù)對比，總能找到最適合自己需要的一款多功能酶標(biāo)儀。