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凝膠成像系統(tǒng)簡(jiǎn)介
[ 2013/6/13 11:03:31 ] [轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明來(lái)源:就是要儀器網(wǎng)]

凝膠成像系統(tǒng)  
    凝膠成像即對(duì)DNA/RNA/蛋白質(zhì)等凝膠電泳不同染色(如eb、考馬氏亮藍(lán)、銀染、sybr green)及微孔板、平皿等非化學(xué)發(fā)光成像檢測(cè)分析。      

    
    凝膠成像系統(tǒng)可以應(yīng)用于分子量計(jì)算,密度掃描,密度定量, PCR定量等生物工程常規(guī)研究。

    總體上來(lái)說(shuō)凝膠成像可應(yīng)用于:凝膠成像系統(tǒng)可以用于:蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析
    

   (1)分子量定量     
     對(duì)于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過(guò)對(duì)膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動(dòng)生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分

子量。通過(guò)這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。    
    
    (2)密度定量
     一般常用的測(cè)定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測(cè)定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個(gè)長(zhǎng)度片段的

濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據(jù)與已知條帶的

密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對(duì)PA GE蛋白膠條帶的濃度測(cè)定。

    (3)密度掃描
     在分子生物學(xué)和生物工程研究中,最常用到的是對(duì)蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法是利用專用的密度掃描,但利用生

物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項(xiàng)工作。

    (4)PCR定量
    PCR定量主要是指,如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來(lái)的條帶不是一條,那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對(duì)百分?jǐn)?shù)。就此功能而言,與密度

掃描類似,但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對(duì)選定的幾條帶進(jìn)行相對(duì)密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù),密度掃描時(shí)并對(duì)選擇區(qū)域生成縱向掃描

曲線圖并積分。

 

凝膠成像種類
    (1)普通凝膠成像分析系統(tǒng):可以對(duì)蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進(jìn)行圖象采集并進(jìn)行定性和定量分析,樣品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監(jiān)測(cè);以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質(zhì)凝膠如考染等。(或UV,EB和有色及可見(jiàn)樣品成像);
    (2)化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學(xué)發(fā)光、紫外-熒光、有色及可見(jiàn)樣品成像;
    (3)多色熒光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見(jiàn)樣品成像;
    (4)多功能活體成像分析系統(tǒng):UV,EB,化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見(jiàn)樣品成像和離體組織和小型動(dòng)物,及大型型動(dòng)物。

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